病理實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)單，實(shí)際上稍不注意細(xì)節(jié)，使用組織切片機(jī)就會(huì)漏洞百出，不同組織如何保存？不同切片有何區(qū)別？刀法需要慢慢練，但該避的坑你不能不懂！

　　

　　今天遠(yuǎn)湘生物匯總了那些關(guān)于組織切片機(jī)進(jìn)行病理切片的問題，看小編如何搞定這些實(shí)驗(yàn)難題。

　　

　　一、組織如何保存？

　　

　　普通病理用固定液（多聚甲醛）保存；免疫組化、免疫熒光實(shí)驗(yàn)不宜固定時(shí)間太久。

　　

　　二、不同組織都用一個(gè)脫水流程嗎？

　　

　　不同組織，其結(jié)構(gòu)不同，脫水流程也有是區(qū)別的

　　

　　三、石蠟包埋切片一般切的厚度是多少？冰凍切片切多厚？

　　

　　冰凍切片厚度為6-10um；石蠟切片為4-6um。

　　

　　四、冰切出現(xiàn)裂痕的原因？

　　

　　可能是防卷板沒放好，冷凍切片機(jī)的溫度一般是零下10到15℃；還有可能是你的組織比較硬或者是刀片的問題，不同組織切片機(jī)里也要不同溫度需要注意一下。

　　

　　五、為什么切片總是脫片？

　　

　　1、粘附劑因素在制作組織學(xué)和病理學(xué)石蠟切片時(shí)，一般用甘油蛋白做粘附劑，但若甘油蛋白配制的時(shí)間過長(zhǎng)，蛋白質(zhì)變性，甘油蛋白的粘附作用即降低，可導(dǎo)致組織切片與載玻片粘附不牢，切片一進(jìn)入二甲苯溶液即從玻片上脫落下來。

　　

　　2、溫度的影響常規(guī)石蠟切片染色，溫度一般在20-37較好。組織從二甲苯脫蠟出來，立即進(jìn)入室溫的純酒精清洗，這樣組織一下從37降至4℃左右，一冷一熱，熱脹冷縮，造成組織容易從載玻片上脫落下來。

　　

　　3、浸蠟時(shí)間的影響，組織取材后在脫水，浸蠟時(shí)間和包埋溫度上掌握不夠準(zhǔn)確，特別是腺體組織比較嬌嫩，稍有過頭組織就變脆，在染色過程中就很容易出現(xiàn)脫片現(xiàn)象。